مقایسه کروماتوگرافی مایع HPLC با کروماتوگرافی گازی GC
مقایسه کروماتوگرافی مایع HPLC با کروماتوگرافی گازی GC
HPLC VS GC
HPLC یا GC کدام یک بهتر است؟
GC برای ترکیبات فرار (آنهایی که به سرعت تجزیه می شوند) استفاده می شود در حالی که HPLC برای نمونه هایی با فراریت کمتر مناسب است.
اگر نمونه ای حاوی نمک است باید با استفاده از HPLC و نه GC مورد تجزیه و تحلیل قرار گیرد.
تفاوت کروماتوگرافی مایع HPLC با کروماتوگرافی گازی GC
بسیاری از ترکیبات شیمیایی ، از جمله داروها و متابولیت ها ، می توانند توسط کروماتوگرافی گازی (GC) یا کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC) تجزیه و تحلیل شوند.
از آنجا که هر دو تکنیک تحت همان اصول اساسی جداسازی ترکیب ، شناسایی و تعیین کمیت عمل می کنند ، انتخاب یک گزینه از دیگری ممکن است گاهی اوقات مشکل باشد. اما دانستن اینکه چه چیزی HPLC و GC را از هم متمایز می کند قطعاً می تواند به روند کمک کند.
خاصیت و طبیعت نمونه مورد آنالیز
GC به موادی پاسخ می دهد که می توانند تغییر ماده در فاز گاز را با گرما – یعنی ترکیبات فرار – تجربه کنند. بنابراین ، GC به ترکیباتی محدود می شود که دارای وزن مولکولی کم و در دمای بالا پایدار باشند.
بنابراین ، اگر با پروتئین ها کار می کنید ، آن را فراموش کنید ، GC مناسب شما نیست.
یک جایگزین برای مولکول های کوچک غیر فرار ، مانند اسیدهای آمینه و قندها ، فرار شدن آنها با مشتقات شیمیایی است.
اکنون گزینه دیگر شما HPLC است. می توانید ترکیبات فرار و غیر فرار را از وزن مولکولی کم تا زیاد تجزیه و تحلیل کنید ، به شرطی که در یک فاز مایع محلول باشند.
همچنین ، لازم نیست نگران پایداری حرارتی باشید زیرا نمونه ها معمولاً در دمای اتاق کار می کنند.
فاز سیار – Mobile Phase
همانطور که از نام آنها پیداست ، فاز متحرک برای HPLC مایع و برای GC گاز است. تفاوت عمده دیگر این است که فاز متحرک یک عامل اصلی در جداسازی نمونه برای HPLC است اما برای GC نیست.
HPLC از مخلوط حلال و گرادیانت استفاده می کند. قطبیت ، حلالیت و پیچیدگی نمونه برخی از عواملی است که در انتخاب فاز متحرک تأثیر می گذارد.
برای اینکه واضح تر باشد ، انتخاب مرحله فاز سیار یک قسمت مهم HPLC است .
در مقابل ، GC از یک گاز بی اثر خالص به عنوان فاز متحرک استفاده می کند. معمولاً به عنوان گاز حامل شناخته می شود زیرا هدف آن حمل مولکول از طریق ستون است.
به طور معمول ، گاز حامل استفاده شده بر اساس نوع دتکتور انتخاب می شود ، بنابراین موضوعی نیست که شما نگران آن باشید.
ستون ها – Columns
ستون های HPLC کوتاه و پهن هستند. در مقابل ، ستون های GC بلند و باریک هستند و در دو نوع کلی وجود دارند. یعنی ستون packed و ستون مویرگی یا کپیلاری Capillary
ستون های مویرگی یا کپیلاری مزایای بسیاری نسبت به ستون های packed دارند ، از جمله رزولوشن
به همین دلیل ، GC مویرگی معمولاً برای تجزیه و تحلیل نمونه های بسیار پیچیده بر HPLC ترجیح داده می شود
دتکتور – Detector
دتکتور ها به خصوصیات شیمیایی یا فیزیکی یک مولکول پاسخ می دهند.
دتکتور هامی توانند همه (یا بیشتر) ترکیبات را تشخیص دهند و برخی دیگر با پاسخ به یک ترکیب خاص انتخابی هستند.
بنابراین ، تشخیص می تواند بسته به اینکه کدام دتکتور در دسترس شما است و اینکه آیا نمونه شما از مشخصات لازم برای تشخیص آن برخوردار است ، می تواند گزینه های شما را محدود کند.
دتکتور های GC از نظر انتخاب و حساسیت متفاوت هستند. آشکارساز یونیزاسیون شعله (FID) و آشکارساز هدایت حرارتی (TCD) دو نمونه متداول هستند.
مورد اول انتخاب هیدروکربن است ، در حالی که مورد دوم عمومی است.
اگر آزمایشگاه شما دارای HPLC است ، احتمال دارد که دارای یک آشکارساز طیف سنجی ماورا بنفش (UV / Vis) باشد ، که به مولکول های جذب کننده نور مانند مواد معطر پاسخ می دهد.
آشکارساز ضریب شکست (Refractive Index Detector ) نیز مناسب آنالیز نمونه های قند , شکر , ساکاروز , مالتوز , فروکتوز , گلوکز , کربوهیدرات ها و پلیمرها میباشد.
با این وجود از حساسیت کم و سازگاری پایین رنج می برد ، بنابراین برای نمونه های پیچیده ایده آل نیست.
بدون شک ، قوی ترین روش تشخیص ، روش ارائه شده توسط GC / MS و HPLC / MS (یا LC / MS) است.
این سیستم های تحلیلی ویژگی های کروماتوگراف را همراه با دتکتور طیف سنج جرمی (MS) ترکیب می کنند.
بنابراین ، یک قسمت اجزا را از هم جدا می کند و قسمت دیگر تجزیه و تحلیل جرم را برای هر یک از این اجزا فراهم می کند
دستگاههای طیف سنج جرمی به شما اطلاعات بیشتری برای شناسایی ترکیب می دهد
چرا ستون های GC از HPLC طولانی تر هستند؟
یک گاز در ستون GC با مقاومت کمتری روبرو می شود که اجازه استفاده از طول ستون های طولانی تر را می دهد.
نمونه هایی که توسط HPLC تجزیه و تحلیل می شوند به طور کلی از نظر حرارتی ناپایدار هستند بنابراین در دمای اتاق در ستون HPLC در فاز مایع هستند
5 نوع کروماتوگرافی کدامند؟
5 نوع اصلی کروماتوگرافی وجود دارد.
کروماتوگرافی مایع ، کروماتوگرافی گازی ، کروماتوگرافی لایه نازک و کروماتوگرافی کاغذی و کروماتوگرافی یونی
از کروماتوگرافی مایع در دنیا برای آزمایش نمونه های آب برای جستجوی آلودگی در دریاچه ها و رودخانه ها استفاده می شود.
هدف از دستگاه گاز کروماتوگراف GC چیست؟
کروماتوگرافی گازی (GC) یک روش تحلیلی است که برای جداسازی اجزای شیمیایی مخلوط نمونه و سپس شناسایی آنها برای تعیین وجود یا عدم وجود آنها و یا میزان آن استفاده می شود.
این اجزای شیمیایی معمولاً مولکولهای آلی یا گازها هستند.
از کدام نوع دتکتور کروماتوگرافی گازی GC بیشتر استفاده می شود؟
آشکارساز یونیزاسیون شعله (FID) تقریباً یک شناساگر خوب نسبت به ترکیبات آلی ، LOD کم و دامنه پاسخ خطی گسترده دارد (107).
پاسخ FID از احتراق ترکیبات آلی در یک شعله کوچک انتشار هیدروژن و هوا حاصل می شود.
دتکتور FID محبوب ترین دتکتور یا شناساگر GC در استفاده فعلی می باشد.
GC FID چگونه کار می کند؟
آشکارساز یونیزاسیون شعله چگونه کار می کند؟ … یک FID از یک شعله برای یونیزه کردن ترکیبات آلی حاوی کربن استفاده می کند.
پس از جداسازی نمونه در ستون GC ، هر آنالیت از طریق شعله ای عبور می کند ، که توسط هیدروژن و Zero Air تأمین می شود ، که یون های اتمهای کربن است.
از کدام گاز در GC استفاده می شود؟
احتمالاً بیش از 90٪ ابزارهای GC موجود با هلیوم به عنوان گاز حامل کار می کنند.
برخی از افراد از هیدروژن یا نیتروژن استفاده می کنند
تفاوت GC-FID و GC/MS چیست؟
GC-FID برای تجزیه و تحلیل کمی قابل اعتماد تر و حساس تر از GC-MS است ، در حالی که GC-MS می تواند اطلاعات کیفی مشخص تر و شناسایی مولکول زیستی را ارائه دهد
معایب کروماتوگرافی گازی GC چیست؟
معایب کروماتوگرافی گازی محدود به نمونه فرار میباشد.
برای نمونه های با درجه حرارت ناپایدار مناسب نیست.
نمونه ها محلول بوده و با ستون واکنش نشان نمی دهند.
در هنگام تزریق نمونه گازی توجه کافی لازم است

چرا از کروماتوگرافی مایع HPLC استفاده می شود؟
کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC) یک روش کروماتوگرافی است که برای تقسیم مخلوطی از ترکیبات در زمینه های شیمی تجزیه ، بیوشیمی و صنعتی استفاده می شود.
اهداف اصلی استفاده از HPLC شناسایی ، کمی سازی و تخلیص تک تک اجزای مخلوط است
چرا HPLC بهتر از طیف سنجی UV است؟
واضح است که HPLC بهتر است. می توانید از آن برای شناسایی ، تعیین و تفکیک استفاده کنید. اما UV / Vis فقط برای شناسایی و تعیین کاربرد دارد. نمی تواند ترکیبات یک مخلوط را جدا کند.
بنابراین ، اگر جداسازی اجزای مخلوط مشکل شما نیست ، به دنبال دستگاه اسپکتروفتومتر UV-VIS بروید ، زیرا زمان کمتری نیاز دارد
مزایای ستون فاز معکوس Reverse phase columns نسبت به فاز نرمال normal phase در HPLC ؟
ستونهای فاز معکوس دارای یک فاز ساکن آبگریز هستند که برای نگهداری بیشتر آنالیتهای آلی به خوبی کار می کند.
کروماتوگرافی فاز معکوس همچنین این مزیت را دارد که می تواند از انتخاب pH برای بهبود جداسازی ها استفاده کند.
همچنین در فازهای ثابت گزینه های بیشتری برای فاز معکوس در مقابل فاز نرمال normal phase وجود دارد.
تفاوت بین دتکتورهای UV و PDA در کروماتوگرافی مایع چیست؟
آشکارسازهایی وجود دارند که انتخاب طول موج وسیع تری را در بر می گیرند و دامنه های UV و VIS (195 ~ 700 نانومتر) را تحت عنوان ردیاب UV / VIS پوشش می دهند.
PDA به طور همزمان یک طیف کامل را تشخیص می دهد.
ردیاب های UV و VIS نتیجه به دست آمده را در دو بعد (شدت نور و زمان) تجسم می کنند ، اما PDA بعد سوم (طول موج) را اضافه می کند
1. آشکارساز UV / Vis می تواند همزمان یک طول موج را تشخیص دهد در حالی که DAD می تواند یک دامنه طول موج را اسکن کند
(190-800 nm). DAD در واقع DAD یا PDA یک آشکارساز UV / Vis خیلی پیشرفته است
2. DAD تمام ترکیباتی را که می توانند در محدوده طول موج داده شده پاسخ دهند (مثلاً 190-800 نانومتر) اسکن می کند ، نیازی به تنظیم نیست. به خودی خود تنظیم می شود.
3. کار و تفسیر هر دو این آشکارسازها به همان اندازه آسان است.
اما DAD از UV / Vis بهتر است زیرا می تواند منطقه 190-800 نانومتر را اسکن کند ، از طرف دیگر ، UV / Vis می تواند فقط یک طول موج را اسکن کند.
بنابراین اگر می خواهید یک دامنه طول موج را اسکن کنید گزینه DAD گزینه بهتری است.
UV-VIS = 2D
PAD or DAD = 3D
تفاوت HPLC فاز معکوس reverse phase و HPLC فاز نرمال Normal phase چیست؟
فاز نرمال Normal phase HPLC به این معنی است که فاز ساکن قطبی است و فاز متحرک غیر قطبی است.
فاز معکوس reverse phase یعنی فاز ساکن غیر قطبی و فاز متحرک قطبی است.
از کدام نوع تکنیک HPLC بیشتر استفاده می شود؟
HPLC فاز معکوس
HPLC فاز معکوس رایج ترین شکل HPLC است.
مقایسه کروماتوگرافی مایع HPLC با کروماتوگرافی گازی GC
مقایسه کروماتوگرافی مایع HPLC با کروماتوگرافی گازی GC
دیدگاهتان را بنویسید