محصولات - ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

توضیحات

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

ستون های کروماتوگرافی دستگاه  HPLC

تامین و فروش ستون های دستگاه کروماتوگرافی  مایع(HPLC) از کمپانی های معروف  ذیل :

• تامین و فروش ستون های کروماتوگراف مایع اجیلنت   Agilent

• تامین و فروش ستون های کروماتوگراف مایع   Perkin Elmer پرکین المر

• تامین و فروش ستون های کروماتوگرافی مایع Thermo Fisher Scientific کمپانی ترمو

• تامین و فروش ستون های کروماتوگرافی مایع واترز (Waters)

اساس کار در انواع ستون های کروماتوگرافی  مایع  HPLC

اساس کار جداسازی نمونه توسط دستگاه hplc  ، رقابتی است که میان  فاز ساکن و فاز متحرک بر سر جذب آنالیت، شکل می گیرد.

روش کار بدین شکل است که  وقتی نمونه (شامل چند جزء) وارد دستگاه hplc  می گردد، اجزایی که تمایل کمتری نسبت  به جذب  فاز ساکن دارند، سریعتر، و اجزائی که تمایل بیشتری به نسبت  به جذب   فاز ساکن دارند، دیرتر از سیستم کروماتوگرافی مایع  hplc  خارج میگردند و با این متد نمونه ها از هم جدا  می شوند.

ستون hplc یا ستون کروماتوگرافی مایع hplc |

خرید ستون hplc   ,   فروش ستون hplc

ستون کروماتوگرافی مایع hplc از مهم ترین اجزای دستگاه hplc میباشد و وظیفه آن جداسازی اجزای نمونه است

انواع ستونهای کروماتوگرافی مایع  UHPLC &  hplc  بر اساس فاز  جداسازی :

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

ستون کروماتوگراف مایع hplc فاز نرمال ( HPLC Normal Phase Columns )

اگر فاز ثابت قطبي و فاز متحرك غيرقطبي باشد سيستم را فاز نرمال و در صورتي كه ستون غيرقطبي و حلال قطبي باشد. سيستم را فاز معكوس مي گويند

یک مزیت سیستم های فاز نرمال سازگاری آنها با عصاره ها در حلال های غیر قطبی است

جداسازی کروماتوگرافی فاز طبیعی مخلوط آزمایش سه رنگ. فاز ثابت قطبی است و رنگ زرد قطبی را به شدت حفظ می کند.

رنگ آبی نسبتاً غیر قطبی در رقابت حفظ توسط فاز متحرک ، یک حلال غیر قطبی برنده می شود و به سرعت از بین می رود.

از آنجا که رنگ آبی بیشتر شبیه فاز متحرک است (هر دو غیر قطبی هستند) ، سریعتر حرکت می کند. برای کروماتوگرافی فاز طبیعی روی سیلیس معمول است که فاز متحرک 100٪ آلی است. هیچ آبی استفاده نمی شود

ستون کروماتوگراف مایع hplc

فاز نرمال HPLC  :

 فاز ساکن  : آلومینا  SiO2, Al2O3

فاز متحرک : Heptane, Hexane, Cyclohexane

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

مزایای استفاده از ستون کروماتوگرافی مایع hplc فاز نرمال  ( HPLC Normal Phase Columns ) :

·         از حلال غیر قطبی می توان برای حل یک نمونه استفاده کرد.

·         برای جداسازی ایزومر و مولکولهای بسیار آب دوست یا آبگریز مناسب است.

·         NP- كروماتوگرافی ترجیحی ترین روش برای كروماتوگرافی ستونی است.

·         با استفاده از حلالهای با ویسکوزیته پایین می توان سرعت جریان بالاتری را داشت.

·         می تواند برای ترکیباتی که می توانند در آب تجزیه شوند استفاده شود.

معایب استفاده از ستون hplc کروماتوگرافی مایع فاز نرمال  ( HPLC Normal Phase Columns ) :

·         برای تجزیه و تحلیل طیف وسیعی از ترکیبات مناسب نیست.

·         به دلیل اختلاط محلول در حلال امکان شستشوی گرادیانت  وجود ندارد.

·         تشکیل حباب و تبخیر می تواند در اثر حلال های نقطه جوش کمتری ایجاد شود.

·         کنترل قدرت حلال دشوار است.

·         retention time اجزا می تواند متغیر باشد.

کاربرد ستون  hplc کروماتوگرافی مایع فاز نرمال  ( HPLC Normal Phase Columns ) :

·         مناسب برای جداسازی ترکیبات غیر یونی و قطبی متوسط ، به ویژه برای نمونه های لیپوفیلی که توسط RPLC به شدت حفظ می شوند

·         لیپیدهای متفاوت از نظر تعداد و موقعیت پیوندهای دوتایی ، توکوفرول ، کاروتنوئیدها ، ویتامین های محلول در چربی و استروئیدها در داروها می توانند با موفقیت توسط NPLC بر روی ستون های ژل سیلیکا یا آلومینا جدا شوند

·         انواع  لیپید مخلوط در عصاره بافتهای حیوانی یا گیاهی را می توان روی ستونهای سیلیس یا ستونهای دارای الکل پلی وینیل پیوندی با استفاده از گرادیانت  حلال پیچیده تجزیه و تحلیل کرد.

·          اولیگو ساکاریدها , دارو ها  و قندها

·         octylphenoxy اتانول سورفاکتانت

·         انواع ویتامین های محلول در چربی ( K , E , D , A )

·         NPLC برای تجزیه و تحلیل فسفولیپیدهای طبیعی در بافتهای عصبی ، گوشت و غیره گزارش شده است.

·          کلاسهای مونو ، دی- و تری اسیل گلیسرول در روغنهای طبیعی را می توان در ستونهای ژل سیلیکا در فاز طبیعی تشخیص داد.

·         جداسازی  استریوایزومرها

·         جداسازی پلیمرهای مصنوعی و الیگومرهای محلول در آب با واحدهای مونومر

ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns) :

اگر ستون غيرقطبي و حلال قطبي باشد. سيستم را فاز معكوس مي گويند

ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس

اصطلاح فاز معکوس حالت کروماتوگرافی را توصیف می کند که دقیقاً برعکس فاز طبیعی است ، یعنی استفاده از یک فاز متحرک قطبی و یک فاز ساکن غیر قطبی [آبگریز].

کروماتوگرافی فاز معکوس رایج ترین تکنیک جداسازی HPLC است و برای جداسازی ترکیباتی که دارای بخش های آبگریز هستند و دارای ویژگی قطبی غالب نیستند استفاده می شود (اگرچه قطبیت یک ترکیب استفاده از RP-HPLC را مستثنی نمی کند).

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

مزایای ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns) ::

1-فرآیند  Modify  راحت تر انجام می شود

2. بنابراین ، جایگشت و ترکیب بیشتر امکان پذیر است

3- تعداد بیشتری ترکیبات قابل شناسایی است

4- کروماتوگرافی فاز معکوس حلالیت بهتری را برای تجزیه کننده های قطبی فراهم می کند

5- از حلال های غیر سمی استفاده می کند

6-روشی را برای حذف آلاینده ها و مواد افزودنی فاز متحرک ارائه می دهد و با کمبود تبخیر حلال ، به موقع نمونه را بازیابی می کند.

7- RP-HPLC اجازه می دهد تا از آب در ترکیب فاز متحرک با حلالهای دیگر استفاده شود.

8- قادر به استفاده از انتخاب pH برای بهبود جدایی است.

9- فاز ساکن آبگریز در ستونهای فاز معکوس برای حفظ بیشتر مولکولهای آلی به خوبی کار می کند.

10- حدود 75 درصد از کل روشهای HPLC از کروماتوگرافی فاز معکوس استفاده می کنند.

معایب  ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns) ::

1-  HPLC    می تواند پرهزینه باشد و به مقدار زیادی مواد آلی گران قیمت نیاز دارد

2-HPLC حساسیت کمی نسبت به برخی ترکیبات دارد و بعضی از آنها قابل شناسایی نیستند زیرا به طور غیرقابل برگشت جذب می شوند.

3- تجزیه و تحلیل ترکیبات و آمین های محلول در آب دشوارتر است.

4- سیلیس ستون فاز معکوس می تواند در pH> 7.5 حل شود.

5- نمونه شسته شده از ستون قابل بازیابی نیست.

مواد فرار با کروماتوگرافی گازی بهتر تفکیک می شوند

کاربرد ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns) :

·         جداسازی و تخلیص ترکیبات بیوشیمی و پروتئومیکس ها

·         تخلیص  فرآیند ، جداسازی مولکول های زیستی فعال ، جداسازی تحلیلی داروها و متابولیت ها

·         استخراج آلاینده های مختلف در نمونه های محیطی

·         کاربرد گسترده در  حوزه  life sciences,  biotechnology &  Preparative

·         کربوهیدرات ها و شکر ,

·         انواع ویتامین های محلول در آب ( B12 , B6 , B5 , B3 , B2 , B1)

·         آنتی بیوتیک ها , انواع دارو , آنزیم , نوکلئوئیک اسید , آنزیم , RNA , DNA

·         اسید چرب , پروتئین , پپتید های سینتیک , لیپید

·         تری گلیسیریدها و کارتنوییدها

ستون های کروماتوگرافی مایع اندازه طردی :  (HPLC Size Exclusion Columns) :

کروماتوگرافی حذف اندازه (SEC) به عنوان کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل نیز شناخته می شود.

ستون های کروماتوگرافی استثنای اندازه معمولاً با ذرات متخلخل پلی استایرن دیوینیل بنزن یا سیلیس پر می شوند.

این ستونها به طور کلی برای تجزیه و تحلیل پلیمرهای مصنوعی در حلالهای آلی استفاده می شود ، در حالی که برای جداسازی بیوپلیمرها از ستونهای مبتنی بر سیلیس استفاده می شود.

فاز ساکن متخلخل در این ستون ها باعث می شود که آنالیت ها بر حسب اندازه آنها از هم جدا شوند.

اجزای نمونه کوچک وارد منافذ فاز ساکن می شوند ، در حالی که مولکول های بزرگتر تا حدی به منافذ نفوذ می کنند.

بنابراین اجزای نمونه بزرگتر به سرعت از مولکول های کوچک شسته می شوند. به طور کلی ، این ستون ها برای تجزیه و تحلیل دارویی استفاده نمی شوند.

ستون های کروماتوگرافی مایع اندازه طردی

کاربرد ستون های کروماتوگرافی مایع اندازه طردی :  (HPLC Size Exclusion Columns) :

·         داروهای زیستی پروتئینی , پپتید و پروتئین

·         جداسازی مونومر و دیمر MAb monomer and dimer

·         جداسازی ترکیبات بیومولکولها و بیوفارما

·         جداسازی فرایند fragmentation, and chemical ligation

·         نشاسته , کربوهیدرات , مخلوط های الیگونوکلئوتیدی , بیوپلیمر

·         زیست مولکول ها و نمونه های بزرگ با وزن مولکولی چندگانه اجزاء

·         پروتئین های کروی ، آنتی بادی ها

·         پلیمرها با وزن مولکولی پایین  و الیگومرها ، الیگوساکاریدها ، PEG ها ، لیگنوسولفونات ها

·         بیوپلیمرهای پلی دیسپرس ، پلی ساکاریدها ، مشتقات سلولز و اسیدهای هیالورونیک

ستون  تبادل یونی HPLC   کروماتوگرافی مایع  (HPLC Ion Exchange Columns) :

با استفاده از این ستون ها ، مولکول هایی که می توانند به سرعت یونیزه شوند تجزیه و تحلیل می شوند.

در این ستون ها ، فاز ساکن برای بار مثبت یا منفی اسیدی یا بازی  باقی می ماند ، در حالی که یک فاز متحرک قطبی به شکل محلول نمک در آب استفاده می شود.

جداسازی اجزا بین اجزا و فاز ساکن شارژ بر اساس نیروی یونی جذاب صورت می گیرد. برای فاز ساکن از محیطهای مختلف استفاده می شود ، بیشترین گروههای باردار بیحرکتی که مورد استفاده قرار می گیرند

عبارتند از: تری متیل آمینو اتیل ، دی اتیل-2-هیدروکسی پروپیل آمینو اتیل ، تری اتیل آمینو اتیل ، دی اتیل آمینو اتیل ، آمینو اتیل ، سولفومتیل ، سولفوپروپیل و سولفو.

از پلی استایرن برای جداسازی مولکولهای کوچک در اسیدهای آمینه به عنوان یک واسطه استفاده می شود.

از محیط سلولز می توان برای جداسازی املاح بزرگ استفاده کرد زیرا منافذ بزرگی دارند.

کاربرد ستون  تبادل یونی HPLC   کروماتوگرافی مایع  (HPLC Ion Exchange Columns) :

·         آدنوویوس ها

·         الیگونوکلئوتیدها

·         تخلیص پروتئین

·         ستون ایده آل برای جداسازی ترکیبات محلول در آب مانند اسیدهای کربوکسیلیک معطر و آلیفاتیک و اسیدهای سولفونیک.

ستون  Affinity کروماتوگراف مایع (HPLC Affinity Columns) :

از روشهای مختلفی برای جداسازی  یا تخلیص پروتئین مورد علاقه از سایر پروتئینها و اجزای موجود در یک ماده سلولز خام یا نمونه دیگر استفاده می شود.

قدرتمندترین این روشها کروماتوگرافی میل ترکیبی است که به آن تخلیص  Purification  میل ترکیبی نیز گفته می شود ، در نتیجه پروتئین مورد نظر به دلیل خاصیت اتصال خاص خود به یک لیگاند بی حرکت  تخلیص می شود.

با این حال ، بیشتر روش های تصفیه شامل نوعی کروماتوگرافی است که به موجب آن مولکول های محلول (فاز متحرک) بر اساس تفاوت در فعل و انفعال شیمیایی یا فیزیکی با یک ماده ثابت (فاز جامد) جدا می شوند.

در فیلتراسیون ژل (که به آن کروماتوگرافی اندازه گریزی اندازه یا SEC نیز گفته می شود) از ماده رزین متخلخل برای جداسازی مولکول ها بر اساس اندازه (به عنوان مثال ، حذف فیزیکی) استفاده می شود.

در کروماتوگرافی تبادل یونی ، مولکول ها با توجه به قدرت فعل و انفعالات یونی کلی آنها با یک ماده فاز جامد (یعنی فعل و انفعالات غیر اختصاصی) از هم جدا می شوند.

ستون افینیتی    Affinity کروماتوگراف مایع

در مقابل ، کروماتوگرافی میل ترکیبی (همچنین تمیز کردن میل ترکیبی نامیده می شود) از فعل و انفعالات اتصال ویژه بین مولکول ها استفاده می کند. یک لیگاند خاص از نظر شیمیایی بی حرکت شده و یا با یک تکیه گاه جامد “جفت شده” است به طوری که وقتی یک مخلوط پیچیده از روی ستون عبور می کند ، آن مولکول هایی که میل خاص اتصال به لیگاند دارند ، متصل می شوند.

پس از شستشوی سایر اجزای نمونه ، مولکول متصل شده از تکیه گاه سلب شده و در نتیجه خالص سازی آن از نمونه اصلی انجام می شود.

ستون c18 hplc اجیلنت

مزایا ستون  Affinity   کروماتوگراف مایع (HPLC Affinity Columns) :

·         بسیار انتخابی

·         بهبود خوب فعالیت بیولوژیکی

·         نمونه متمرکز بر روی ستون

·         اغلب ایزوله یک مرحله ای است

کاربرد ستون  Affinity   کروماتوگراف مایع (HPLC Affinity Columns) :

·         پروتئین A برای جداسازی آنالیزی IgG (انسان و موش) ، به جز IgG کلاس 3 طراحی شده است.

·         تعیین کمی IgG (fermentation titer )

·         ژل الکتروفورز 2-D gel electrophoresis

·         آلبومین ، IgG ، آنتی تریپسین ، IgA ، ترانسفرین ،

·         هاپتوگلوبین ، فیبرینوژن ، آلفا 2-

·         ماکروگلوبولین ، گلیکوپروتئین اسید آلفا 1 ،

·         IgM ، آپولیپوپروتئین Al ، آپولیپوپروتئین ،

·         مکمل C3 ، ترانزیستین

·         Albumin, IgG, antitrypsin, IgA, transferrin, haptoglobin, fibrinogen, alpha2- macroglobulin, alpha1-acid glycoprotein, IgM, apolipoprotein Al, apolipoprotein All, complement C3, transthyretin

سئوالات متداول 

تفاوت میان ستون C8 و  ستون C18  ؟

C18 تمایل به حفظ بیش از C8 خواهد داشت. در این صورت ، اگر ترکیب مشابهی روی دو ستون شسته شود ، روی C8 سریعتر و در C18 کندتر شسته می شود. 

به عبارت دیگر ، C18 دارای زنجیره های اکتادسیلی است که معمولاً آبگریز هستند و ترکیبات غیر قطبی را بسیار حفظ می کنند.

چرا ستون c18 در HPLC استفاده می شود؟

C18 متداولترین ستون در HPLC فاز معکوس است زیرا می تواند طیف وسیعی از اجزا را در مقایسه با سایر ستونها جدا کند.

ستون c18 قطبی است یا غیر قطبی؟

ستون با ذرات ژل سیلیکا پوشانیده شده است. سطح سیلیس مورد استفاده در ستون قطبی است زیرا با سیلانول پوشانده شده است.

چند نوع HPLC وجود دارد؟

بسته به مرحله ثابت در فرآیند ، 4 نوع HPLC وجود دارد

1- HPLC فاز نرمال

2-HPLC فاز معکوس

3- HPLC اندازه طردی

4- HPLC تبادل یونی

تفاوت ستون های C8 و C18 HPLC چیست؟

·         تفاوت اصلی بین ستونهای C8 و C18 در اتمهای کربن آنهاست. C8 دارای 8 اتم کربن است ، در حالی که C18 دارای 18 اتم کربن است.

• C8 دارای یک زنجیره کربن کوچک است ، در حالی که C18 دارای یک زنجیره کربن طولانی تر است.
• C8 کوتاه است ، در حالی که C18 زمان ماندگاری بیشتری دارد (RT).

·         ستون C8 آبگریز کمتری است اما در مقابل ستون C18 آبگریزتر است.

·         ستون C8 تفکیک نسبتاً کمی ایجاد می کند ، اما ستون C18 تفکیک بیشتری ایجاد می کند.

·         ستون C8 ترکیبات آلی کوچک را بهتر جدا می کند ، در حالی که ستون C18 اسیدهای چرب با زنجیره طولانی را به خوبی جدا می کند

ستون گارد چیست؟

ستون HPLC با استفاده از ستون محافظ در برابر ناخالصی ها و جامدات معلق محافظت می شود.

ستون گارد  میان  اینجکتور HPLC و ستون تنظیم شده است.

ستونهای محافظ معمولاً برای طولانی شدن عمر ستونهای تحلیلی استفاده می شوند.

طول آن معمولاً حدود 2 سانتی متر است و دارای یک کارتریج قابل تعویض و طرح بسته بندی قابل تعویض است.

کدام نوع دتکتور در  HPLC بیشتر مورد استفاده قرار می گیرد؟

دتکتور های UV / VIS و PDA متداول ترین دتکتور در HPLC هستند زیرا حساسیت بالاتری را برای ترکیبات جاذب نور ایجاد می کنند.

GC یا HPLC کدام یک بهتر است؟

کروماتوگرافی گازی (GC) برای جداسازی ترکیبات فرار بهتر است ، در حالی که کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC) برای جداسازی نمونه های با فراریت  کمتر بهتر است.

کلیدواژه : خرید ستون hplc agilent zorbax , قیمت ستون کروماتوگرافی مایع اجیلنت , فروش ستون hplc waters  , قیمت ستون hplc proshell agilent  , خرید ستون کروماتوگرافی مایع اجیلنت ZoRBaX Eclipse Plus columns , خرید ستون hplc waters واترز , فروش ستون کروماتوگرافی مایع اجیلنت  1260 infinity  , خرید ستون c8 agilent  , قیمت ستون کروماتوگرافی مایع  c18 agilent , خرید ستون affinity , آنالیز پروتیین , انالیز افلاتوکسین , انالیز مایکوتوکسین , انالیز سموم کشاورزی , غذایی و دارویی , فروش ستون hplc کروماتوگرافی , تامین و فروش ستون های دستگاه کروماتوگرافی  مایع(HPLC) , تامین و فروش ستون های کروماتوگراف مایع  اجیلنت   Agilent ,

تامین و فروش ستون های کروماتوگراف مایع    Perkin Elmer پرکین المر

تامین  و فروش ستون های کروماتوگرافی مایع Thermo Fisher Scientific کمپانی ترمو

تامین و فروش ستون های کروماتوگرافی مایع واترز (Waters)

ستون hplc یا ستون کروماتوگرافی مایع hplc |

خرید ستون hplc   ,   فروش ستون hplc

ستون  hplc کروماتوگرافی مایع فاز نرمال

ستون c18

ستون c18

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC

ستون های کروماتوگرافی GC & HPLC