سئوالات رایج دستگاه نانودراپ
سئوالات رایج دستگاه نانودراپ
در کدام برنامه دستگاه نانودراپ ترمو فیشر NanoDrop One می توانم از ویژگی شناسایی آلودگی Acclaro استفاده کنم؟
ویژگی شناسایی آلودگی Acclaro در برنامه های dsDNA ، RNA و پروتئین A280 پیاده سازی شده است.
ویژگی تشخیص آلودگی Acclaro روی طیف سنجی نانودراپ NanoDrop One چگونه کار می کند؟
ویژگی شناسایی آلودگی Acclaro از یک روش شیمی برای تجزیه و تحلیل اجزای شیمیایی موجود در یک نمونه استفاده می کند.
این نوع تجزیه و تحلیل قبلاً در طیف سنجی مادون قرمز تبدیل فوریه (FTIR) و سیستم های مادون قرمز NIR (به عنوان مثال طیف سنج های Thermo Scientific Nicolet) استفاده شده است.
الگوریتم های Acclaro به کتابخانه مرجع طیف ها reference library of spectra متکی است.
سپس این الگوریتم ها روی طیف نمونه اعمال می شوند و نرم افزار می تواند با استفاده از اصول ریاضی شیمی سنجی ، پیش بینی هایی در مورد آلودگی های نمونه انجام دهد.
آیا می توانم پروتئین های تخلیص شده و تخلیص نشده را با اسپکتروفتومتر نانودراپ NanoDrop One/Onec اندازه گیری کنم؟
پروتئین های تخلیص شده را می توان مستقیماً با استفاده از برنامه های از پیش تنظیم شده A280 یا A205 اندازه گیری کرد.
مناسب ترین ضریب تضعیف extinction coefficient را از بین انواع نمونه پروتئین از پیش تعریف شده (BSA ، IgG ، Lysozyme) از لیست دستگاه انتخاب کنید یا پروتئین سفارشی خود را با استفاده از ویژگی ویرایشگر پروتئین اضافه کنید.
برای پروتئین های تخلیص نشده یا لیزات سلولی cell lysates ، مجموعه ای از برنامه های سنجش رنگ سنجی از پیش تنظیم شده pre-configured colorimetric assay در دسترس است.
چه برنامه های از پیش تنظیم شده ای در دستگاه نانودراپ ترمو فیشر NanoDrop One و NanoDrop Onec گنجانده شده است؟
در زیر لیست برخی برنامه های از پیش تنظیم شده موجود در طیف سنج های نانودراپ NanoDrop One/Onec وجود دارد:
– اسید نوکلئیک A260 (ds DNA ، ssDNA ، oligo DNA ، oligo RNA ، custom factor ) ، A260/280 ، A260/230 و Microarray (اسیدهای نوکلئیک labeled nucleic acids)
– پروتئین A280 و A205 ، پروتئین پیرس 660 ، پروتئین بردفورد ، پروتئین BCA ، پروتئین لوری ، پروتئین ها و برچسب ها
– OD600
– سینتیک ، UV-Vis و روش های سفارشی
دستگاه نانودراپ NanoDrop One/Onec چه تفاوتی با دستگاه اسپکتروفتومتر معمولی مبتنی بر کووت دارند؟
اسپکتروفتومترهای نانودراپ NanoDrop One/Onec از سیستم نگهداری نمونه microvolume patented برای به حداقل رساندن مصرف نمونه و رفع نیاز به کووت استفاده می کنند.
یک ویژگی طول مسیر متغیر و محدوده خودکار به کاربران اجازه می دهد تا 366 برابر غلظت نمونه را بیشتر از اندازه گیری شده در یک کووت 10 میلیمتری اندازه گیری کنند و مراحل رقیق سازی را غیر ضروری می کند.
هنگام استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر نانودراپ ترمو فیشر ، مزایای روش سنجش Pierce 660 assay نسبت به روش سنجش بردفورد چیست؟
هر دو روش mix-and-measure هستند(حداقل زمان انکوباسیون و بدون مراحل گرمایش).
Pierce 660 Assay نقطه پایانی پایدار تری دارد.
وقتی از اسپکتروفتومتر نانودراپ استفاده می کنیم ، نسبت مناسب برای نمونه پروتئین خالص چقدر است؟
یک پروتئین تخلیص شده باید نسبت خلوص 260/280 تقریباً 0.63 را نشان دهد.
A purified protein should show a 260/280 purity ratio of approximately 0.63
هنگام استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر نانودراپ ، نسبت خلوص قابل قبول چیست؟
– نمونه های اسید نوکلئیک
Nucleic acid samples: A260/A280 ratios of 1.8-2.2; A260/A230 ratios of 1.8-2.2 are generally considered pure
– نمونه های پروتئینی
Protein samples: A260/A280 ratio of approximately 0.63 is generally considered pure
نانو دراپ چیست؟
نانودروپ یک دستگاه اسپکتروفتومتر آزمایشگاهی متداول است
زمان کمتر آماده سازی و پاکسازی به این معنی است که می توانید چندین نمونه را در کمتر از یک دقیقه اندازه گیری کنید ، در مقایسه با آنچه برای خواندن فقط یک نمونه در یک کووت سنتی لازم است.
هدف نانو دراپ چیست؟
دستگاه نانودراپ به دانشمندان اجازه می دهد تا به سرعت و به آسانی خلوص نمونه هایی مانند پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک را اندازه گیری و ارزیابی کنند.
تقریباً برای هر آزمایشگاهی که با نمونه های بیولوژیکی سروکار دارد ، ابزارهای NanoDrop به دلیل سرعت ، سادگی و عملکرد قوی اغلب در آزمایشگاه محبوب هستند.
چگونه نانو دراپ غلظت RNA را اندازه گیری می کند؟
روش سنتی برای ارزیابی غلظت و خلوص RNA ، طیف سنجی UV است.
میزان جذب یک نمونه RNA رقیق شده در طول موج 260 و 280 نانومتر اندازه گیری می شود.
غلظت اسید نوکلئیک با استفاده از قانون بیر-لامبرت محاسبه می شود ، که تغییر خطی در جذب را با غلظت پیش بینی می کند.
آیا می توانیم از نانودراپ برای غلظت پروتئین استفاده کنیم؟
دستگاه اسپکتروفتومتر نانودراپ همچنین می تواند برای اندازه گیری محلول های پروتئینی uncharacterized ، لیزات سلولی و عصاره های پروتئین خام با استفاده از روش های رنگ سنجی استفاده شود.
بر خلاف روش پروتئین A280 ، روش پروتئین BCA مستلزم آن است که قبل از اندازه گیری غلظت پروتئین نمونه ، یک منحنی استاندارد ایجاد شود.
سئوالات رایج دستگاه نانودراپ
سئوالات رایج دستگاه نانودراپ
سئوالات رایج دستگاه نانودراپ
دیدگاهتان را بنویسید