توضیحات

دستگاه کروماتوگرافی مایع  HPLC

دستگاه HPLC  کمپانی Thermo Fisher Scientific  مدل Ultimate 3000

دستگاه  HPLC سری  Ultimate 3000 یکی از بهترین دستگاههای کروماتوگرافی دنیا میباشد که توسط کمپانی  Dionex تولید شده و اکنون زیر نظر کمپانی  Thermo Fisher Scientific میباشد.

دستگاه  HPLC سری  Ultimate 3000  با پمپ فوق العاده عالی فشار Psi 9000-18200  را فراهم میسازد و کاربری دستگاه کروماتوگرافی مایع چه بصورت HPLC و چه بصورت  UHPLC تسهیل میکند.

دستگاه HPLC مدل Ultimate 3000 به 4 مدل Rapid Separation , Semi Preparative  , Standard Analytical & Basic  تقسیم میشود

مدل Analytical Flow HPLC Ultimate 3000  خود به 4 دسته Isocratic , Binary , Quaternary , Dual-Gradientتقسیم میشود

دستگاه HPLC مدل Ultimate 3000 مناسب آزمایشگاه‌های آنالیتیکال , کنترل کیفیت و تضمین کیفیت و تحقیق و توسعه  میباشد.

دستگاه HPLC مدل Ultimate 3000    جریان حلال را بدون پالس از   1nL/min تا   50mL/min تضمین می‌کند

مزایای دستگاه HPLC  کمپانی Thermo Fisher Scientific  مدل Ultimate 3000 :

• دارای پمپ عالی : فشار  9000-18200    Psi

• دارای Flow Range بسیار گسترده :      از   1nL/min تا   50mL/min

• کنترل مؤثر ستون و دما با ترموستات   Thermostat  Multicolumn  که باعث تثبیت  دمای مورد نیاز از  5C تا  +110C سانتی گراد با توجه به نیاز کاربر را فراهم می شود.

• اتوسمپلر پیشرفته Ultimate 3000   که قابلیت جایگذاری نمونه از 120 تا 1152 ویال را ( بسته به اندازه ویال ) را دارد .اتوسمپلر دستگاه  HPLC Ultimate 3000  دارای  کانفیگورهای مختلف  میباشد که بسته به نیاز مراکز و کاربرد آن  انتخاب میشوند

• حد تشخیص پایین با استفاده از دتکتور VWD ( Variable Wavelength Detector ) تا  200  هرتز

• همخوانی با همه دتکتورهای کمپانی اجیلنت مانند Refractive , Fluorescence FLD , Mass , ELSD , DAD

کاربرد دستگاه HPLC  کمپانی Thermo Fisher Scientific  مدل Ultimate 3000  :

• آنالیز آمینواسیدها
• آنالیز ویتامین D
• آنالیز دارویی
• تجزیه و تحلیل 18 هیدروکربن آروماتیک چند حلقه ای (PAHs) با استفاده از ستون PAH Hypersil
• ارزیابی ویتامین های محلول در آب در قرص های ویتامین با استفاده از Acclaim PA
• تجزیه و تحلیل لوریل سولفات اتوکسیله شده
• بنزالکونیوم در ضد عفونی کننده اسپری در ستون Acclaim Surfactant –
• تعیین کمیت و خصوصیات لیپیدها با استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا
• تعیین کمی از آنالیز ناخالصی ترکیبات نامعلوم در مواد مؤثر دارویی با استفاده از HPLC
• تعیین میزان متابولیت های مواد مخدر در آزمایش کشف مواد مخدر در مرحله اولیه
• کمیت و خصوصیات افزودنیهای حمام آبکاری مس با استفاده از کروماتوگرافی مایع با شناسایی آئروسل
• تجزیه و تحلیل آنتی بادی N– گلیکان با دتکتور فلورسانس و دتکتور جرمی Mass
• وزن مولکولی پروتئین
• تعیین مقدار کانابینوئیدها در حشیش صنعتی
• تجزیه و تحلیل و آنالیز داروهای ضد افسردگی تقلبی توسط UHPLC
• تجزیه و تحلیل کیفی روغنهای زیتون و شناسایی تقلبات زیتون
• انالیز خشکبار , پسته و مواد غذایی مانند انالیز افلاتوکسین بوسیله hplc
• تعیین فیلترهای ماوراء بنفش UV در ضد آفتاب ها با استفاده از پاکسازی لیپید Captiva EMR
• تعیین اسکارلین در روغن زیتون
• تجزیه و تحلیل آلدهیدها و کتونهای مشتق شده  از DNPH
• آنالیز محصولات لبنی بدون لاکتوز
• آنالیز پاراستامول و آسپرین در داروهای تسکین دهنده درد
• آنالیز آموکسی سیلین و پنج ناخالصی
• آنالیز مایکوتوکسین توسط HPLC

دستگاه  HPLC  یک نوع دستگاه کروماتوگرافی مایع میباشد که به منظور  جداسازی ( Separation )  نمونه به اجزای مشخص و با فشار مشخص به کار می‌رود. اساس روش دستگاه HPLC بر خلاف دستگاه کروماتوگرافی گازی  GC  جداسازی بر مبنای برهم کنش نمونه با فازهای ساکن  (Stationary Phase)  و متحرک (Mobile Phase)  انجام می‌شود. از آنجائی که ترکیب های مختلفی از فازهای ساکن (ثابت) و متحرک برای جداسازی یک مخلوط وجود دارد، انواع گوناگونی از دستگاههای کروماتوگرافی وجود دارد که بر مبنای حالت فیزیکی این فازها تقسیم‌بندی می‌شوند.

 تاریخچه کروماتوگرافی:
تکنیک کروماتوگرافی (Chromatography)، اولین بار توسط گیاه شناس روسی در سال 1903 کشف شد.

 یک آشکارساز ایده آل باید حساسیت مناسب داشته، پایدار باشد، و از دقت، صحت و تکرارپذیری مناسبی برخوردار باشد. 

حد تشخیص (detection limit) و گستره خطی (linearity range) آشکارساز برای آنالیزهای کمی بسیار اهمیت دارد.

انواع دتکتورهای دستگاه  HPLC از کمپانی Thermo Fisher Scientific 

• دتکتور UV-Vis :

 رایج ترین نوع دتکتور در  آزمایشگاه آنالیز می باشد. در دستگاه کروماتوگرافی مایع، نمونه وارد یک سل شفاف شده و سپس نورفرابنفش به آن تابیده می شود. با تابش نور به سل دتکتور، قسمتی از نور توسط نمونه جذب و مابقی از آن عبور می کند. اساس کار دتکتور UV-Vis   تفاوت میزان جذب نمونه با منبع نوری اولیه و در نهایت با استفاده از قانون بیر لامبرت غلظت نمونه اندازه گیری می شود.

• دتکتور VWD ( Variable Wavelength Detector ) :

مدل پیشرفته دتکتور  UV-Vis میباشد , در حال حاضر دتکتور  UV-Vis برای دستگاههای HPLC Agilent وجود ندارد و مدل پیشرفته آن یعنی دتکتور  VWD که بر خلاف دتکتور UV-Vis تک سیگنالی بود , قابلیت اندازه گیری همزمان چندین طیف را دارد و باعث کاهش زمان آنالیز  و افزایش بهره وری خواهد شد

• دتکتور PDA ( Photo Diode Array ) :

 آشکارساز (Photodiode Array Detector) PDA  فرایند آشکارسازی  کل طیف را به صورت همزمان و یکجا  فراهم می آورد.

دتکتور  PDA  نسبت به دو دتکتور  UV-Vis & VWD  کارایی بهتر , سرعت بالاتر و قابلیت آنالیز اطلاعات بصورت  3D را دارد آشکارسازهای UV-Vis طیف ها را براساس 2  بعد زمان و شدت نور تعیین می کنند، در حالیکه آشکارساز PDA بعد سوم 3D  طول موج را نیز اضافه می کند.

قیمت دتکتور PDA  نسبت به دو دتکتور  UV-Vis & VWD گرانتر است.

• دتکتور فلورسانس FLD ( Fluorescence ) :

مزیت عمده دتکتور فلورسانس  حساسیت و گزینش پذیری بالاست اما ترکیب موردنظر باید خاصیت جدب فلورسانسی داشته باشد. با استفاده از یک طول موج خاص اتم های آنالیت برانگیخته شده و نشر فلورسانس آنها متناسب با غلظت اتم خواهد بود. برای ترکیباتی که خاصیت فلورسانس ندارند، می توان با مشتق سازی با ترکیبات فلورسانس مانند دنزیل کلراید (dansylchloride) و تبدیل به یک ترکیب فلورسانس آنالیز شوند.

کاربرد دتکتور فلورسانس : آنالیز آفلاتوکسین ها , آنالیز مایکوتوکسین ها , آنالیز مشتقات B1 , B2 , G1 , G2

آنالیز مشتقات  M1 در شیر و لبنیات

• دتکتور ضریب شکست(Refractive Index, RI )

این آشکارساز تغییرات ضریب شکست را اندازه گیری می کند. یک سل شیشه ای به دو محفظه مشابه تقسیم می شود. خروجی ستون وارد محفظه نمونه شده و یک محفظه دیگر فقط از فاز متحرک پر می شود. اگر خروجی ستون حاوی آنالیت باشد، نور تابیده شده در نتیجه اختلاف در اجزاء در دو محفظه سل، شکست می یابد. اندازه این تغییرات نشان دهنده حضور اجزاء نمونه است. این آشکارساز حساسیت کمتری از آشکارسازهای جذبی دارد. به همه ترکیبات پاسخ می دهد. وقتی نمونه ها گروه های کرموفور ندارند، مانند قند، الکل یا یون های غیر آلی، و هم چنین وقتی حلال جاذب نور UV/VIS است، بسیار مفید است.

کاربرد دتکتور Refractive در انالیز کربوهیدرات , قند و شکرها و پلیمرها کاربرد دارد

مانند انالیز گلوکز , فروکتوز , ساکاروز , مالتوز

• دتکتور طیف سنج جرمی (Mass Spectrometry detectors)

 یکی از قوی ترین آشکارسازهای مورد استفاده در کروماتوگرافی مایعLC  است که تلفیقی از روش LC  و طیف سنج جرمی است و به اختصار LC-MS نامیده می شود. در طیف سنج جرمی جداسازی یون ها بر اساس نسبت جرم به بار (m/z) آنها و تحت تاثیر میدان های الکتریکی و مغناطیسی صورت می گیرد. در واقع اجزای نمونه پس از جداسازی در ستون کروماتوگرافی، وارد محفظه یونش طیف سنج جرمی می شوند و با استفاده از میدان های الکتریکی و مغناطیسی شناسایی کمی و کیفی اجزاء نمونه براساس m/z صورت می گیرد.