آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC Agilent با رزولوشن بالا
High-Resolution Sampling 2D-LC for Pharmaceutical Impurity Analysis
تشخیص ناخالصی های پنهان در زیر پیک API در سطوح مربوطه
داروسازی و ژنریک مولکول های کوچک
آنالیز ناخالصی ها در غلظت های پایین نسبت به یک ماده دارویی فعال active pharmaceutical ingredient (API) برای کنترل کیفیت مواد دارویی مهم است.
هنگامی که ناخالصی ها از نظر ساختاری مشابه API هستند و اختلاف غلظت زیاد است، جداسازی و تشخیص کروماتوگرافی می تواند چالش برانگیز باشد.
جهت آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC Agilent با رزولوشن بالا Agilent 1290 Infinity II 2D-LC امکان سوییچ آسان بین مدهای ذیل را دارد
- (LCxLC)
- multiple heart-cutting (MHC)
- high‑resolution sampling 2D-LC (HiRes 2D-LC)
در این مقاله کاربردی، HiRes 2D-LC برای دستیابی به جداسازی دو ترکیب نزدیک به eluting استفاده میشود، که یکی از آنها در غلظت بسیار کم وجود دارد و در زیر پیک ترکیبی با غلظت بالا دیگر پنهان میشود.
اسیدهای کلرودی فلوروبنزوئیک و انسولین دآمید شده به ترتیب به عنوان مواد استاندارد و نمونه واقعی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.
مقدمه
آنالیز خلوص مواد دارویی از نظر کیفیت و ایمنی بیمار از اهمیت بالایی برخوردار است.
طبق دستورالعمل ICH Q3A(R2)، ناخالصی در یک ماده دارویی جدید باید بالاتر از آستانه 0.05٪ نسبت به API گزارش شود.
جداسازی و تشخیص ناخالصی ها در این سطوح می تواند چالش برانگیز باشد، به خصوص زمانی که ناخالصی از نظر ساختاری با ماده فعال دارویی (API) مرتبط باشد.
این مقاله کاربردی استفاده از نمونه برداری با وضوح بالا (HiRes) 2D-LC را برای جداسازی و تشخیص ناخالصی ها نشان می دهد که نمونه ای از ایزومرهای مختلف اسید کلرودی فلوروبنزوئیک در غلظت های نسبی 100٪ و 0.05٪ است.
دقت و صحت را میتوان با استفاده از حلکننده ناخالصی تشخیص آرایه دیودی محدوده دینامیکی بالا (HDR-DAD) Agilent 1290 Infinity II به عنوان آشکارساز دوبعدی برای این برنامه بهبود بخشید.
انسولین دآمید شده به عنوان یک نمونه واقعی برای نشان دادن تشخیص یک ناخالصی ساختاری مشابه با نمونه برداری HiRes 2D LC/MS تجزیه و تحلیل می شود.
در اینجا، 2D-LC دارای این مزیت اضافی است که جداسازی 2 بعدی به عنوان یک مرحله نمک زدایی عمل می کند، و از سرکوب یون ناشی از مقادیر زیاد نمک از بافر 1 بعدی در منبع یون MS جلوگیری می کند.
2D Chromatogram Creator for Agilent MassHunter برای مشاهده و تجزیه و تحلیل داده های 2D-LC/MS در MassHunter استفاده می شود.
Experimental
Equipment
The Agilent 1290 Infinity II 2D-LC Solution was composed of the following modules:
- Two Agilent 1290 Infinity II High Speed Pumps (G7120A)
- Agilent 1290 Infinity II Multisampler (G7167B) with Infinity II Sample Cooler (Option #100)
- Two Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostats (G7116B)
- Three Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detectors (G7117B) with 3.7‑mm, 10-mm, and 60‑mm Max‑Light Cartridge Cells (G4212‑60008)
- Agilent 1290 Infinity Valve Drive (G1170A) with 2-position/4-port-duo valve (2D-LC valve head, G4236A)
- Two Agilent 1290 Infinity Valve Drives (G1170A) with multiple heart-cutting valves (G4242-64000) equipped with 40-μL loops
برای انالیز انسولین دآمید شده، محلول Agilent 1290 Infinity II 2D-LC به یک Agilent 6545 Q-TOF مجهز به منبع ESI جت استریم Dual Agilent جفت شد.
برای جلوگیری از ورود مقادیر زیاد نمک از بافر 1 بعدی به منبع یون، از یک جدول زمانی برای تعویض دریچه دیورتر MS استفاده شد که جریان را برای اولین دقیقه از هر تجزیه و تحلیل دوبعدی به سمت هدر میبرد، همانطور که در Application Note5 قبلی توصیه شده بود.
انالیز اسیدهای کلرودی فلوئوروبنزوئیک
مخلوطی از سه ایزومر 2-کلرو-4،5-دی فلوروبنزوئیک اسید (ترکیب 1)
5-کلرو-2،4- دی فلوروبنزوئیک اسید (ترکیب 2)
و 3-کلرو-2،4-دی فلوروبنزوئیک اسید (ترکیب 3، ساختارهای شکل 4)
در نسبتهای غلظتی مختلف با استفاده از نمونهگیری HiRes 2D-LC، ابتدا با Agilent 1290 Infinity II DAD با سل کارتریج به عنوان آشکارساز دوبعدی، آنالیز شد.
نتیجه گیری
این مقاله کاربردی تشخیص ناخالصیهای سطح پایین موجود در نمونهای از یک ترکیب اصلی مرتبط با ساختار را با استفاده از نمونهبرداری با وضوح بالا 2D-LC نشان میدهد.
با استفاده از مخلوطی از اسیدهای کلرودی فلوئوروبنزوئیک، نشان داده شده است که ترکیبات در غلظت های نسبی 0.05٪، 0.10٪، 0.15٪ و 100٪ مطابق با دستورالعمل ICH در مورد ناخالصی های موجود در مواد دارویی جدید، که نمی توانند به طور جداگانه در تجزیه و تحلیل 1 بعدی شناسایی شوند، هستند. توسط HiRes نمونه برداری 2D-LC به ستون 2 بعدی منتقل و جدا شد.
ترکیب 5-chloro-2،4-difluorobenzoic اسید با مقادیر دقت 71.6-108.5٪ تشخیص داده شد.
دقت Area precision 2.71-7.95٪ بود.
محلول انالایزر ناخالصی Agilent 1290 Infinity II HDR-DAD به عنوان آشکارساز دوبعدی اجازه می دهد تا حجم تزریق بالاتری داشته باشد که منجر به بهبود دقت 96.4-108.5 درصد و دقت ناحیه 1.44-1.58 درصد می شود.
انسولین دآمید شده به عنوان یک نمونه واقعی برای تجزیه و تحلیل با نمونه گیری HiRes 2D-LC/MS استفاده شد.
داده ها با استفاده از 2D Chromatogram Creator for Agilent MassHunter ارزیابی شدند.
آنالیز ناخالصی impurity analysis چیست؟
جداسازی و شناسایی Isolation and identification اجزا و ناخالصی های ناشناخته.
وجود یک جزء ناشناخته یا ناخالصی در سطوح حتی می تواند صدمات جبران ناپذیری به محصول وارد کند و بسته به کاربرد محصول آن را غیرقابل استفاده کند.
ناخالصی در انالیز دارویی چیست؟
ناخالصی های دارویی مواد شیمیایی ناخواسته ای هستند که در حالت فعال باقی می مانند.
ترکیبات دارویی (API) یا فرمولاسیون محصولات دارویی. pharmaceutical ingredients (APIs) or drug product formulations
ناخالصی ها مشاهده شده در مواد دارویی ممکن است در طول سنتز ایجاد شود یا ممکن است از آن مشتق شود.
Deamidation چیست ؟
دآمیداسیون یک واکنش شیمیایی است که در آن یک گروه عامل آمید در زنجیره جانبی اسیدهای آمینه آسپاراژین یا گلوتامین حذف یا به گروه عاملی دیگر تبدیل می شود.
به طور معمول، آسپاراژین به اسید آسپارتیک یا ایزواسپارتیک اسید تبدیل می شود.
چگونه ناخالصی در هر قرصی انالیز می شود؟
محصول ممکن است تحت فرآیندهایی مانند تست های دمای بالا، تست های نور فرابنفش، تست سطح pH، تست های رطوبت و غیره قرار گیرد.
این آزمایش ها برای درک خواص فیزیکی یا ساختارهای مولکولی ناخالصی های بالقوه انجام می شود.
چگونه ناخالصی ها را در HPLC محاسبه می کنید؟
Ri – Area of each impurity Peak in the chromatogram of the sample solution
Rs – Sum of areas of Main drug and all impurity Peaks in the chromatogram of the sample solution
RF – Response Factor.
Total Impurities = Sum of known impurities + Sum of unknown impurities.
خلوص دارو چگونه تعیین می شود؟
کتابچه راهنمای آنالیز دارویی مدرن
خلوص اندازه گیری مقدار یک جزء رایج از یک ماده دارویی است که فقط آن جزء وجود داشته باشد.
خالص ترین ماده به طور کلی به عنوان یک استاندارد مرجع در نظر گرفته می شود و برای تعیین خلوص یک دارو با روش مقایسه ای طیف سنجی UV استفاده می شود.
چرا از گرادیان در HPLC استفاده می شود؟
گرادیان ها در HPLC فاز معکوس معمولاً شامل اختلاط آنلاین (دینامیک) حلال ها برای دستیابی به افزایش ثابت در حلال آلی (معمولاً متانول یا استونیتریل) در طول دوره تجزیه و تحلیل است که به افزایش قدرت شستشوی در طول زمان elutionکمک می کند.
ستون C18 چیست؟
ستون C18 نمونه ای از ستون “فاز معکوس” است.
ستون های فاز معکوس اغلب با حلال های قطبی تر مانند آب، متانول یا استونیتریل استفاده می شوند.
فاز ثابت یک هیدروکربن غیر قطبی است، در حالی که فاز متحرک یک مایع قطبی است. همین رویکرد را می توان در TLC نیز استفاده کرد.
چرا خلوص purity در داروها مهم است؟
اهمیت خلوص در APIها
در دسترس بودن ناخالصی ها می تواند فرمولاسیون را کاملاً تغییر دهد و آن را کاملاً چیز دیگری کند زیرا مواد شیمیایی واکنش متفاوتی دارند.
به عنوان مثال، اجزای شیمیایی اشتباه در فرمول دارویی می تواند یک دارو را برای انسان خطرناک کند.
ستون USP چیست؟
طبق فارماکوپیای ایالات متحده (USP)، پکینگ ستون L1 به عنوان “اکتادسیل سیلان که از نظر شیمیایی به ریز ذرات سیلیس متخلخل یا سرامیک با قطر 3 تا 10 متر متصل شده است” تعریف می شود.
برخی از روشهای USP که ستون L1 را مشخص میکنند، از pH متوسط استفاده میکنند و بسیاری از این روشها بر روی یک ستون 10 متری، 3.9×300 میلیمتر انجام میشوند.
ستون C8 در HPLC چیست؟
ستون C8 نوعی ستون است که در کروماتوگرافی فاز معکوس استفاده می شود. به طور کلی، کروماتوگرافی فاز معکوس از یک فاز ثابت آبگریز استفاده می کند.
با این حال، فاز ثابت نگهدارنده جامد یا ستون حاوی سیلیس اصلاح شده است. در اینجا سیلیس یک فاز ساکن آبدوست است.
ستون L7 چیست؟
ستونهای USP L7 به عنوان اکتیل سیلان (C8) توصیف میشوند که از نظر شیمیایی به ذرات سیلیس متخلخل با قطر 1.5 تا 10 میکرومتر مرتبط است.
چرا ستون C18 بیشتر در HPLC استفاده می شود؟
C18 برای جداسازی ترکیباتی مانند اسیدهای چرب با زنجیره بلند در مقایسه با ترکیبات آلی نسبتا کوچک بهتر در نظر گرفته می شود. این نسبتاً ارزان است زیرا در مقادیر زیادی توسط اکثر تولید کنندگان تولید می شود.
چند نوع ستون در HPLC وجود دارد؟
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) نوعی کروماتوگرافی مایع است که از فاز سیار مایع استفاده می کند.
همان اصول اولیه کروماتوگرافی گازی در کروماتوگرافی مایع اعمال می شود.
سه نوع اصلی ستون های کروماتوگرافی مایع وجود دارد: مایع-مایع، مایع-جامد و تبادل یونی.
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC
کلیدواه: آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC,انالیز دارو,انالیز 2 بعدی داروسازی,داروسازی,کروماتوگرافی,کروماتوگرافی مایع,hplc,hplc agilent, , انالیز ناخالصی دارویی,انالیز ناخالصی,تعیین خلوص,آنالیز 2 بعدی ناخالصی دارویی توسط دستگاه HPLC Agilent با رزولوشن بالا
دیدگاهتان را بنویسید